HEMATOLOGÍA: EL HEMOGRAMA. Reticulocitos y Eritrosedimentación.

HEMATOLOGÍA: EL HEMOGRAMA

Uno de los análisis de laboratorio más solicitado, junto al análisis de química sanguínea y orina.
Evalua las células sanguíneas: glóbulos rojos, glóbulos blancos y plaquetas.

Para su realización se debe extraer sangre y colocarla en un tubo con anticoagulante EDTA (Acido Etilen Diamino Tetracético), generalmente tripotásico (K3) o dipotásico (K2).
Con la inversión del tubo de 8 a 10 veces se asegura la homogenización del anticoagulante con la sangre, ayudando a prevenir formación de coágulos                    

El EDTA inhibe el proceso de coagulación secuestrando el calcio de la sangre. Reduce la activación plaquetaria protegiendo a las plaquetas durante el contacto de la sangre con la superficie interna del tubo. Es el aditivo idóneo para la realización del recuento de leucocitos, plaquetas, y hematíes. También para la determinación de la fórmula leucocitaria y citometría de flujo ya que se conserva la morfología de las células de la sangre.

El paciente no debe realizar ayuno. Sin embargo, muchos laboratorios recomiendan que sea de 8 horas.

El perfil hemático o HEMOGRAMA comprende:

·         Recuento de glóbulos rojos

·         Hemoglobina

·         Hematocrito

·         Índices hematimétricos:

-          VCM: volumen corpuscular medio

-          HCM: hemoglobina corpuscular media

-          CHCM: concentración de hemoglobina corpuscular media

-          RDW: ancho de distribución eritrocitaria

·        

Recuerden que los valores de referencia pueden variar según la población, área geográfica y autoanalizador.

Recuento de plaquetas

·         VPM: volumen plaquetario medio

·         Recuento de glóbulos blancos

·         Formula leucocitaria

·         En algunos casos: frotis sanguíneo y reticulocitos.

Comenzaremos detallando la serie roja:

RECUENTO DE GLÓBULOS ROJOS, HEMATIES O ERITROCITOS (GR): Nos indica la cantidad de globulos rojos por milímetro cubico.

º  Se expresa en millones por milímetros cúbicos (mm3)

º  Valores de referencia: 4.5 – 5 millones/mm3.

º  Su conteo puede realizarse en contador hematológico o cámara de Neubawer.

Anemia: disminución de eritrocitos, tamaño o nivel de hemoglobina (Hb)

Poliglobulia/eritrocitosis: aumento de eritrocitos, tamaño o nivel de Hb.

<<< Sin embargo, para un adecuado diagnóstico de anemia es necesario determinar la concentración de hemoglobina >>>

HEMOGLOBINA (Hb): Nos indica la concentración de hemoglobina. proteína que se encuentra dentro del GR, es una proteína especializada en el transporte de oxígeno (O2) desde los pulmones hacia los tejidos y de dióxido de carbono (CO2) desde los tejidos hacia los pulmones.

º  Se expresa en gramos por decilitros (g/dl)

º  Valores de referencia: M: 12-16 g/dl    H: 16-18 g/dl

º  Se mide en contador hematológico.

º  Parámetro definitorio de anemia. Puede producirse:

-          Disminución de Hb independiente de la cantidad de GR.

-          Aumento de Hb y GR = policitemia, si está acompañado de aumento de GB y plaquetas.

HEMATOCRITO (HTO): Representa la proporción de GR en el total de sangre.

º  Se expresa en porcentaje (%)

º  Valores de referencia: M: 36-46 %   H: 37-53 %

º  Varía según la cantidad de GR, el tamaño y forma de estos.  

-          Hto elevado: deshidratación, hemoconcentración, poliglobulia. 

-          Hto disminución: anemias, hemodilución.

º  Se mide de forma manual por medio de capilares que se llenan de sangre, se centrifugan y por medio de un abaco se realiza su lectura, o en autoanalizador por un cálculo en que se utilizan parámetros medidos: VCM y número de GR. (VCM x nro de GR/ 10)        

<<< El hematocrito se relaciona directamente con el recuento de eritrocitos y con la hemoglobina, por lo que su medida constituye un procedimiento adicional para el diagnóstico de anemia, particularmente útil en el banco de sangre para la clasificación y la selección de donantes >>>

INDICES HEMATIMÉTRICOS: También conocidos como índices corpusculares, fueron descritos por Wintrobe en 1932 y se han utilizado por muchos años como punto de partida para la clasificación morfológica de las anemias.

VCM (VOLUMEN CORPUSCULAR MEDIO): Nos indica el volumen y tamaño del eritrocito promedio.

º  Se expresa en femtolitros (fl)

º  Valores de referencia: 83-97 fl

º  Se mide por contador hematológico o fórmula:  VCM: HTO X 10/ nro de GR

º  Nos ayuda a clasificar las anemias en:

-          MICROCITICA => VCM bajo = GR pequeños (An. Ferropénica, talasemias)

-          NORMOCITICA => VCM normal = GR normales

-          MACROCITICA => VCM elevado = GR grandes (déficit B12, fólico, hepatopatías, hipotiroidismo)

      HCM (HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA): Nos indica la cantidad de hemoglobina de cada eritrocito.

º  Se expresa en picogramos (pg)

º  Valores de referencia: 28-32 pg

º  Se mide por contador hematológico o haciendo la siguiente fórmula:  HCM: HB X 10/ nro de GR

º  Nos ayuda a reconocer la coloración de los GR y así clasificar las anemias:

-          HIPOCROMICA => HCM bajo = GR pálidos (an. Ferropénica, talasemia)

-          NORMOCROMICA => HCM normal = GR de coloración normal

-          HIPERCROMICA => HCM elevado = GR hiper pigmentados. Casi nunca corresponde utilizar este término.

      CHCM (CONCENTRACIÓN DE HEMOGLOBINA CORPUSCULAR MEDIA): nos indica la concentración de hemoglobina en el eritrocito, teniendo en cuenta el peso y el volumen.

º  Se expresa en gramos por decilitros (g/dl)

º  Valores de referencia: 33-37 g/dl

º  Se mide por contador hematológico o por medio de la siguiente fórmula: CHCM: HB X 100/HTO

      RDW (ANCHO DE DISTRIBUCION ERITROCITARIA): nos indica el grado de anisocitosis de los glóbulos rojos. La anisocitosis es la variación en los tamaños de los eritrocitos.

º  Se expresa en %

º  Valores de referencia: hasta 14%

º  Cuanto menor sea el porcentaje, más homogénea es la población de eritrocitos.

º  El ancho de distribución de los eritrocitos, junto al volumen corpuscular medio, es uno de los criterios en la clasificación morfológica de las anemias carenciales (deficiencia de hierro, vitamina B12, ácido fólico) El RDW es uno de los primeros parámetros que se modifica en el hemograma, desde mucho antes de que se den cambios en el tamaño de los eritrocitos (volumen corpuscular medio) o que la hemoglobina se reduzca a niveles anémicos.

º  Solo se mide en contador hematológico.

EN OCASIONES EL MEDICO PUEDE PEDIR JUNTO AL ANÁLISIS DEL HEMOGRAMA…

RECUENTO DE RETICULOCITOS: se determina la cantidad de eritrocitos inmaduros, llamados reticulocitos, que a diferencia de los eritrocitos maduros, contienen ácido ribonucleico (ARN) en su citoplasma. Indica el funcionamiento de la médula ósea.

º  Se expresa en porcentaje (%)

º  Valores de referencia: 0.5-1%  RN: 2-6 %

º  El conteo debe hacerse lo antes posible

º  Aumento => anemias regenerativas, hemolíticas, hemorragias internas y externas.

º  Disminución => aplasia medular, leucemias

º  Se mide por microscopia o contador hematológico (citometría de flujo)

Seguiremos detallando lo que conforma la serie blanca:

RECUENTO DE GLÓBULOS BLANCOS O LEUCOCITOS (GB): nos indica la cantidad de glóbulos blancos por milímetro cubico.

º  Se expresa en miles por milímetros cúbicos (/mm3)

º  Valores de referencia: 4000-10000 /mm3

º  Se mide por contador hematológico o recuento manual (cámara de neubawer)

º  Leucocitosis => infecciones, quemaduras, inflamación, etc.

º  Leucopenia => leucemia

FORMULA LEUCOCITARIA, RELATIVA O RECUENTO DIFERENCIAL: Nos indica el porcentaje que hay de cada tipo de GB en sangre periférica.

º  Se expresa en porcentaje (%)

º  Valores de referencia:

-          Neutrófilos: 50-70%

-          Eosinófilos: 2-4%

-          Basofilos: < 1%

-          Linfocitos: 20-30%

-          Monocitos: 2-8 %

º  Se llega a estos valores por recuento manual observando el extendido de sangre periférica. Hoy en dia gracias a la citometría de flujo, por contadores hematológicos.

CALCULO DE LA CIFRA ABSOLUTA DE CADA GLÓBULO BLANCO: Nos indica la cantidad de cada tipo de leucocito en el total del recuento realizado.

º  No se informa, pero es necesario saberlo.

º  Se puede realizar la siguiente formula donde se utiliza el conteo total de leucocitos y el % del tipo celular:       nro de GB totales X % de tipo de GB/ 100= CANTIDAD DEL TIPO DE GB

EXTENDIDO DE SANGRE PERIFÉRICA O FROTIS SANGUÍNEO: es un extendido de sangre sobre un portaobjetos, con él podemos ver la morfología de GR Y GB. 

Nos ayuda a verificar los resultados arrojados por los autoanalizadores. Antiguamente era el único método para llegar a la formula leucocitaria o recuento diferencial. Si no se cuenta con un autoanalizador que evalúe la formula leucocitaria debemos recurrir a la observación del extendido.

Se realiza de punta de aguja (preferiblemente) o utilizando una gota del tubo con EDTA. Esta gota se coloca en un portaobjetos y con un extensor se realiza de manera firme y rápida el extendido, se deja secar y se procede a su tinción con colorantes para ser observada al microscopio.

Hay distintas tinciones. Nosotros utilizaremos la de Giemsa.

izq: frotis sin teñir
der: frotis coloreado

Procedimiento:

1.       Realiza el extendido y se deja secar.

2.       Se fija el extendido colocándole alcohol metílico (metanol) durante 4-5’ transcurrido ese tiempo decantar el metanol.

3.       Cubrir las extensiones con solución de Giemsa recién diluida a 1/10 (1 parte de Giemsa por 9 partes
de agua destilada) y dejar actuar durante 25 minutos.

4.       Lavar las extensiones con agua destilada para eliminar los restos de colorante.

5.       Secar las extensiones al aire, colocas en vertical.

6.       Observar los frotis sanguíneos teñidos al microscopio óptico.

A tener en cuenta…. Las extensiones deben estar bien hechas para evitar que las células se vean superpuestas.



Zonas del frotis:

Se presentan tres zonas de grosor diferente que presentan una distribución distinta de las células:

• Cabeza: parte cercana al punto de comienzo de la extensión. Los linfocitos están aumentados y los GR se ven apilados.
• Cuerpo: o zona central. Los linfocitos y hematies se reparten de forma equilibrada. Es la zona ideal para la observación de células.
• Cola: o zona final. Aquí se acumulan granulocitos y monocitos. Los GR se encuentran deformados.

Seguimos con la serie trombocítica o plaquetaria:

RECUENTO DE PLAQUETAS (PLQ): Nos indica la cantidad de plaquetas por milímetro cubico.

º  Se expresa en miles por milímetros cúbicos (/mm3)

º  Valores de referencia: 150.000-440.000/mm3

º  Aumento de plq= Trombocitosis => coágulos

º  Disminución de plq= Trombocitopenia => hemorragias

º  Se realiza su conteo manualmente o por contador hematológico.

VPM (VOLUMEN PLAQUETARIO MEDIO): corresponde al tamaño promedio de las plaquetas.

º  Se expresa en femtolitros

º  Valor de referencia: 8-12 fl

º  define los conceptos de microtrombocito(sis), normotrombocito(sis) y macrotrombocito(sis) para referirse al tamaño de las plaquetas: disminuido, normal y aumentado, respectivamente.

º  Se mide por contador hematológico.

OTRO ANÁLISIS RUTINARIO DENTRO DEL SECTOR DE HEMATOLOGÍA ES:

ERITROSEDIMENTACIÓN (ERS) O VELOCIDAD DE SEDIMENTACIÓN (VSG): Mide la velocidad con que los glóbulos rojos sedimentan en un determinado tiempo (1 hora).

Se utiliza un tubo con anticoagulante citrato de sodio al 3,8 % o un tubo de tapa negra según el codigo internacional de colores.

Fundamento: en situación normal, los GR tienen carga neta negativa y hay rechazo entre ellos, manteniéndose separados, en situaciones de enfermedad algunas proteínas plasmáticas (reactantes de fase aguda) se cargan positivamente y neutralizan las cargas de los GR, lo que favorece la formación de “pilas de monedas” o rollos => aumento ERS.

º  Se expresa en milímetros por hora (mm/h)

º  Valores de referencia: M: hasta 15 mm    H: hasta 12 mm

º  Aumento ERS => inflamaciones, embarazo, necrosis tisular, infecciones bacterianas, anemia, elevación de reactantes de fase aguda.

º  Disminución ERS => medicamentos

Método de Westergren: El estándar de oro para medir la eritrosedimentación es el método introducido por Westergren en 1926.
Forma de uso utilizando el tubo de la marca DVS: Tubo con citrato de sodio al 3.8% con tapón troquelado (fig. 1). Introduzca el cono de la jeringa con muestra a través del tapón (fig. 2). Dispense hasta el nivel adecuado (fig. 3). Mezclar invirtiendo suavemente el tubo para impedir la formación de espuma (fig. 4). Una vez que la muestra llega al Laboratorio, homogeneizar; introduzca la pipeta firmemente en el tubo atravesando el tapón (fig. 5); una vez hecho esto, la columna de sangre ascenderá hasta alcanzar el “0” (fig. 6). El exceso de muestra se descargará en el rebalsador de seguridad (fig. 7), el cual cumple la doble función de enrasar correctamente dicha muestra y evitar salpicaduras. Por último coloque el conjunto en la gradilla-soporte (Fig. 8). Lea luego de pasada 1 hora.

Otro tipo de tubo y gradilla que se puede utilizar en la determinación de eritrosedimentación.

<<< El hemograma junto a la eritrosedimentación son los estudios hematológicos más comunes pedidos por el médico. Se le puede adiccionar el recuento de reticulocitos que es menos frecuente que se pida como análisis de rutina.>>>